Collagenous matrix as a predictor for bone formation: a digital technique for collagen quantification

The collagenous matrix plays a fundamental role in the process of bone regeneration, so it is essential to study how it is primarily formed in situations in which critical bone defects are created. Objective: this study seeks to quantify the collagenous matrix formed in critical bone defects in the calvaria of mice over the process of bone regeneration promoted by the association of poly(lactide-co-glycolide) (PLGA) porous scaffolds and stem cells from deciduous teeth (SCDT). In addition, this study attempted to establish a precise protocol for the digital quantification of collagen through a histological method. Materials and method: Nine Wistar rats were used, in which critical defects of 8.0 mm of diameter were made in their calvarium. The animals were divided into three groups (n = 9): I ­ PLGA scaffolds; II ­ PLGA scaffolds/SCDT; III ­ PLGA scaffolds/SCDT maintained in osteogenic medium for 13 days. Within sixty postoperative days, calvaria were removed for histometric analysis following a digital protocol. A specific digital analysis method was designed for this study, in which a more precise quantification and differentiation between collagen fibers and non-collagenous tissue was possible, excluding factors that would normally alter the results. Results: it was noted that the association of PLGA scaffolds and SCDT maintained in osteogenic medium resulted in collagen matrix formation statistically higher than the other groups (p<0.05). Conclusion: the protocol designed for collagen quantification was precise and efficient, producing methodologically standardized results.

Comparative analysis of two fixating and two decalcifying solutions for processing of human primary teeth with inactive dentin carious lesion

O objetivo deste estudo foi analisar qualitativamente a preservação das características teciduais pulpares de dentes decíduos ântero-superiores humanos com lesão cariosa de natureza inativa em dentina, comparando-se duas soluções fixadoras (paraformaldeído a 4% e formalina a 10%, ambos com tampão fosfato 0,1 M) e descalcificadoras [ácido fórmico/citrato de sódio – solução de Ana Morse e EDTA (ácido etileno diamino tetracético) a 10%]. Oito dentes foram subdivididos em 4 grupos (n = 2), variando-se o agente fixador e descalcificador. Grupo 1: paraformaldeído a 4% e solução de Ana Morse; Grupo 2: formalina a 10% e solução de Ana Morse; Grupo 3: paraformaldeído a 4% e EDTA a 10%; Grupo 4: formalina a 10% e EDTA a 10%. Os dentes foram fixados e posteriormente descalcificados até que uma consistência borrachóide fosse obtida. Cortes histológicos de 6μm de espessura foram corados com hematoxilina e eosina (H&E). A fixação com ambas as soluções demonstrou boa conservação tecidual, enquanto que a descalcificação com a solução de Ana Morse pareceu mais adequada, por requerer um menor tempo de processamento das amostras e promover uma melhor preservação dos componentes celulares e da matriz extracelular do tecido pulpar. O EDTA, além de exigir um tempo mais longo de processamento das peças, alterou as características morfológicas da polpa. A combinação formol a 10% – solução de Ana Morse pareceu ser favorável para a metodologia deste estudo.

Estudo comparativo da morfologia da polpa dentária de dentes humanos submetidos à técnica de clivagem e a técnicas de descalcificação química / Comparative study of dental pulp morphology from human teeth submitted to cutting technique or chemistry decalcification technique

Os rápidos avanços do conhecimento acerca do reparo e regeneração tecidual, têm despertado o interesse pela biologia pulpar. Entretanto, para avaliar microscopicamente a dinâmica do tecido pulpar, é necessário, inicialmente, que o dente seja submetido aos processamentos histológicos de fixação e descalcificação. A descalcificação pode afetar o grau de coloração e pode causar desnaturação de proteínas. Além disso, é um processo demorado, visto que o dente requer um longo período de desmineralização. Assim, a proposta deste trabalho foi de avaliar qualitativamente a matriz extracelular e as células da polpa dentária, comparando três grupos: dois em que o tecido dentário foi descalcificado e um em que a polpa foi removida dos tecidos duros, não necessitando do processo de descalcificação. Dez pré-molares foram fixados em formalina tamponada a 10% por 24 horas. Após, estes dentes foram divididos em três grupos: 4 dentes foram submetidos a processo de descalcificação por meio de solução de Morse, 3 por meio de solução de EDTA a 10% e; os 3 dentes restantes tiveram sua polpa separada dos tecidos duros dentários por meio da técnica de clivagem. Na seqüência, os três grupos foram processados por meio da técnica histológica de rotina e foram corados com H/E. Os resultados desta análise demonstraram que houve uma melhor conservação tanto da matriz extracelular, quanto das estruturas celulares no grupo da clivagem, seguido do grupo Morse e por fim, com a menor conservação das estruturas pelo grupo EDTA.

The rapid advances of the knowledge of repair and regeneration tissues had proved to be an exciting time for pulp biology. However, to study the dynamic of pulp tissue, it is necessary, initially, that the tooth be submitted to histological fixation and decalcification processing. Decalcification may affect the degree of staining and it may cause denaturation of proteins. Furthermore, it is a slow process, demanding long demineralization times for a tooth. Thus, the purpose of the present study was to compare, qualitatively, the pulp extracellular matrix and the pulp cells, submitted to different techniques: EDTA solution decalcification, Anna Morse solution decalcification and a last group which pulp was removed from tooth without decalcification. Ten premolar teeth were fixed in 10% buffered formalin for 24 hours. After this, the teeth were divided in three groups: 4 teeth underwent decalcification with Morse solution; 3, decalcification with 10% EDTA solution and; 3, were sectioned and their pulps were gently removed. Subsequently, the groups followed the routine histological technique and staining with H/E. The results demonstrated that both conservation of pulp cells and extracellular matrix were better in the group without decalcification, followed by the Morse group and, the last, with the worst structures conservation for the EDTA group.

A estrutura da dentina do dente decíduo e sua importâcia clínica / The dentin structure of the teeth deciduous and its clinical importance

Os autores fazem rápida revisäo bibliográfica a respeito da formaçäo e estrutura de dentina em geral. Ressaltam o fato de pouco existir na literatura consultada sobre a arquitetura e gênese da dentina decídua, sendo que os poucos trabalhos existentes estabelecem uma analogia entre a polpa e a dentina decídua dos dentes permanentes. Frente aos achados na literatura, analisaram o comportamento da dentina e polpa do dente decíduo no processo dinâmico de desmineralizaçäo/remineralizaçäo, seu comportamento diante dos fenômenos de erosäo/abrasäo e, finalmente junto aos materiais adesivos täo largamente usados atualmente